精子的收集
禁欲三到五天后，用手淫的方法把精子收集到无菌的容器里。禁欲是为了让精子质量更好，冷冻保存的效果更稳定。射出的精液一开始是液态的，但很快会变成胶状，大约半小时内又会液化，这时候就可以测量体积了。为了冷冻效果最好，收集后一分钟内就要开始处理。
体积测量和初步处理
用校准过的工具测量精液体积，有时候也用重量差来计算。取一小部分精液做分析，看看精子活动力和密度怎么样。另外还要取一些做性病筛查，比如检查淋球菌什么的，确保安全。
添加保护剂和冷冻
甘油是常用的冷冻保护剂，可以直接加到精液里，或者先稀释再加。在美国，很多精子库还用甘油，但新的地方开始用含甘油的缓冲系统。加甘油的时候不用特别控制温度，室温就行，混匀就好。
处理好的精液装到塑料管或小瓶里，每份0.4到0.8毫升，这算一个人工授精的单位。容器要容易标记和储存，聚丙烯的比较好，不容易碎。冷冻前还要做个质量控制样品，看看各阶段精子的活动力，确保冷冻后还能用。
冷冻时，精液放在液氮气雾或冷冻柜里冷却，可以用人工慢慢冻，也可以用电脑控制。储存时，样品放在液氮里的金属容器中，温度保持在零下196度。有装置监视液氮水平，防止温度升高。长期储存一般不会让精子活动力下降，除非一开始没测准或储存条件不好。
解冻和使用
冷冻的精子暴露在空气或水里就能解冻，通常室温就行，具体看精子库的方法。如果需要用冷冻精子做试管婴儿，精子库会按要求送到医院。运送时放在液氮或干冰的盒子里，如果精子库就在医院附近，可以直接送过去。解冻后可以再检查一下精子状态，确保好用。
